磷脂IgA篩查試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

ELISA操作顯色過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答
1） 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2） 使用變質(zhì)的顯色劑。

3）未使用完畢的顯色劑返回原瓶造成污染

4）顯色反應(yīng)不避光，或有陽(yáng)光直射
解決辦法：
1） 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用；
2） A、B 液應(yīng)避免接觸金屬器械。

3）使用量根據(jù)樣本需要量取，取出后未使用完畢的顯色液應(yīng)棄去，不能再次返回原試劑瓶，以免造成顯色液污染，影響下次使用；

4）TMB對(duì)光敏感，一般顯色反應(yīng)要避光進(jìn)行；

通用名稱：磷脂IgA篩查試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Phospholipid IgA Screen ELISA
產(chǎn)品貨號(hào)：RE70421
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測(cè)樣本：血清
公司品牌：德國(guó)IBL
儲(chǔ)存條件：2-8℃
檢測(cè)方法：ELISA方法
預(yù)期用途：用于組合定性和定量檢測(cè)人血清中磷脂的IgA抗體
參考價(jià)格：詢價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司

磷脂IgAELISA試劑盒預(yù)期用途
      磷脂IgA篩查試劑盒用于組合定性和定量檢測(cè)人血清中磷脂的IgA抗體。該測(cè)定是系統(tǒng)性紅斑狼瘡和抗磷脂綜合征（APS）患者血栓形成診斷和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的輔助工具。

磷脂前言介紹

 針對(duì)磷脂，生物膜組分的抗體對(duì)磷脂如心磷脂，磷脂酰肌醇，乙存胺，膽堿，鞘磷脂和磷脂酸是特異性的。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清常發(fā)現(xiàn)抗磷脂抗體紅斑狼瘡（SLE）和相關(guān)疾病。 在患有SLE和相關(guān)疾病的患者中發(fā)生抗磷脂抗體是二次抗磷脂綜合征（APS）的典型。 相比之下，沒(méi)有其他自身免疫性疾病的患者中的抗磷脂抗體是主要APS的特征。許多研究表明，這些自身抗體與血栓形成，血小板減少癥和習(xí)慣性流產(chǎn)的發(fā)生率（胎盤(pán)梗死的結(jié)果）增強(qiáng)相關(guān)。 致病性抗磷脂抗體誘導(dǎo)血栓形成的確切機(jī)制尚未*揭示。

磷脂IgAELISA試劑盒檢測(cè)原理

用1:10稀釋的血清樣品在包被特異抗原的微孔板中孵育。 患者的抗體（如果存在于標(biāo)本中）與抗原結(jié)合。 在隨后的步驟中將未結(jié)合的物質(zhì)洗掉。 之后辣根過(guò)氧化物酶（綴合物）綴合的抗人免疫球蛋白與微量培養(yǎng)板中樣品的抗原 - 抗體復(fù)合物反應(yīng)。未結(jié)合的共軛物在隨后的步驟中洗掉。 添加TMB底物產(chǎn)生一個(gè)酶促比色（藍(lán)色）反應(yīng)，其被稀釋的酸停止（顏色變化到黃色）。 來(lái)自底物的顏色形成的強(qiáng)度是其中的一種與抗原 - 抗體復(fù)合物結(jié)合的綴合物的量，并且這與患者樣品中各抗體的初始濃度成比例。

磷脂IgA篩查試劑盒組成成分
●微孔板——12×8孔——每孔用高度純化的牛心磷脂，β2-糖蛋白I，磷脂酰絲氨酸，肌醇，乙存胺，膽堿和鞘磷脂包被。
●陰性質(zhì)控品——1×1.5ml——綠蓋，無(wú)色，含人血清,BSA ,防腐劑
●陽(yáng)性質(zhì)控品——1×1.5ml——紅蓋，黃色，含人血清,BSA ,防腐劑
●臨界標(biāo)準(zhǔn)品——1×1.5ml——藍(lán)蓋，黃色，含人血清,BSA ,防腐劑
●標(biāo)準(zhǔn)品——6×1.5ml——白蓋，黃色，標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為：0,3,10,30,100,300U/ml，含人血清,BSA ,防腐劑。
●酶聯(lián)物 IgA——1×15ml——紅蓋，紅色，含HRP標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，BSA等
●TMB底物液——1×15ml——黑蓋，無(wú)色，內(nèi)含TMB及H2O2。
●終止液——1×15ml——白蓋，無(wú)色，內(nèi)含1M的鹽酸，
●洗滌液（50X）——1×20ml——50倍濃縮，白蓋，綠色，含tris.Nacl,tw-20,防腐劑
●稀釋液（5X）——1×20ml——5倍濃縮，白蓋，黃色，含tris.Nacl,BSA,防腐劑

磷脂IgA篩查試劑盒儲(chǔ)存條件

      磷脂IgA篩查試劑盒應(yīng)當(dāng)2~8℃的環(huán)境下儲(chǔ)存。一旦開(kāi)封，重組的各試劑在2-8℃可保存一個(gè)月，磷脂IgA篩查試劑盒酶標(biāo)板應(yīng)在各自標(biāo)識(shí)的日期內(nèi)使用，TMB溶液應(yīng)避光。微孔板條一但被拆開(kāi)，應(yīng)當(dāng)將其重新密封好，并加入干燥劑。

磷脂IgA篩查試劑盒檢測(cè)步驟
●準(zhǔn)備好所需試劑。
●根據(jù)需要選擇定性或定量檢測(cè)。
●定性檢測(cè)：每孔加入100ul陰性質(zhì)控，臨界質(zhì)控，陽(yáng)性質(zhì)控和樣本；定量檢測(cè)，每孔加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品A-F，陰性質(zhì)控，陽(yáng)性質(zhì)控和樣本。
●20-32℃溫育30分鐘。
●每孔用300μl洗滌液洗板3次（注意：洗板步驟是否操作正確會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和精密度。
●在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。
●20-32℃溫育30分鐘。
●每孔用300μl洗滌液洗板3次。
●在每一微孔加TMB底物液100μl。
●20-32℃溫育30分鐘，避免陽(yáng)光直射。
●按底物加入非順序，每孔加100μl終止液以終止底物反應(yīng)。
●至少孵育5s，并輕輕混勻
●加終止液后30min內(nèi)在450nm讀取OD值。（參照波長(zhǎng)：620nm）

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