人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒（ELISA）
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒產品詳細 | 中文名稱 | 人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒（ELISA） | | 英文名稱 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA | | 產品貨號 | 27812 | | 產品規格 | 96T | | 檢測樣本 | 人腦脊液 | | 適應物種 | 人 | | 預期用途 | 可用于檢測人腦脊液磷酸化Tau蛋白的定量檢測 | | 產品品牌 | 日本IBL | | 供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
人磷酸化Tau蛋白 ELISA試劑盒預期用途
人磷酸化Tau蛋白 ELISA試劑盒可用于人腦脊液的磷酸化Tau蛋白定量檢測，僅供科研用，不用于臨床診斷。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒檢測原理
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒是固相夾心ELISA（酶聯免疫吸附測定）。當將*抗體包被在平板上時，將樣品和標準品加入到板孔中進行*次反應。 反應后，加入HRP-綴合的二抗進入板孔進行第二次反應。 沖洗掉未結合的二抗后，將四甲基聯本胺（TMB）加入孔中并顯色。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒儲存條件
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒可保存于2-8℃下保存，有效期見試劑盒外包裝。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒成分
| 96T x 1 | 預包被板 | | 0.4mL x 1 | 酶標記抗體： (30倍濃縮)HRP標記抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’） | | 0.5mL x 2 | 標準品: 重組人Tau441 | | 30mL x 1 | EIA緩沖液 | | 12mL x 1 | 標記抗體稀釋液 | | 15mL x 1 | 顯色劑 | | 12mL x 1 | 終止液 | | 50mL x 1 | 濃縮洗滌液: |
人磷酸化Tau蛋白檢測實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)
■酶標儀
■微移液管及其槍頭
■量筒及燒杯
■去離子水
■冰箱(4°C)
■坐標紙(log/log)
■吸水紙
■試管(用于標準品稀釋)
■洗瓶 (用于洗板)
■孵育器（37±1℃）
■一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒實驗步驟
1.使用前，將所有試劑應平衡至室溫，大約30min，充分混勻，確保試劑質量無改變，標準曲線和樣品檢測必須同時進行.
2.確定樣本空白孔，并加入100ulEIA緩沖液。
3.確定樣本孔和標準品孔，樣本和標準品（管1-7）100ul分別加入相應的孔中
4.蓋板，*次孵育，
5.洗板，按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液，后在吸水紙上*拍干。
6.將每孔中加入100ul 準備好的標記抗體
7.蓋板，第二次孵育
8.洗板，按照前述“操作注意事項"中第8-9條進行。使用稀釋好的洗滌液，后在吸水紙上*拍干。
9.取需要量的底物液到一次性檢測管中，每孔加入100ulTMB溶液。為了避免污染，檢測管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
10.黑暗中室溫孵育30min，顏色變藍。
11.每孔加入100ul 終止液終止反應，通過點擊板的一面來混合板內溶液，此時顏色變為黃色。
12.讀取OD值：將板底污物清除，并保證板孔內無氣泡，以空白孔為對照進行標準品和樣本的測量。測量在450nm處進行，參考波長600-650nm，測量應在終止液加入后30min內進行。
人磷酸化Tau蛋白檢測試劑盒檢測步驟表格如下
| 試劑 | 待檢測樣品 | 標準品 | 樣品空白 | | 檢測樣品100ul | 稀釋標準品（1-7管）100ul | EIA緩沖液 | | 蓋板，2-8°C下溫育過夜 | | 洗板4次（每孔加洗滌液不少于350ul，按操作注意事項中的8和9條進行 | | 酶標抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | | 蓋板，2-8°C下溫育30min | | 洗板5次（每孔加洗滌液不少于350ul，按操作注意事項中的8和9條進行 | | 底物液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 室溫避光溫育30min | | 終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | | 加終止液后,30min內于450nm/600-650nm處讀取OD值， |
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