脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

ELISA方法操作結(jié)果判斷過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答

1） 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差，或者沒(méi)有運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線；質(zhì)控不在控。

2） 出現(xiàn)假陰性結(jié)果或假陽(yáng)性結(jié)果

3） 測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性差

4） 全部板孔不顯色或全部顯色，無(wú)法判斷結(jié)果

解決方法：

1. 加樣時(shí)，不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品使用不同槍頭。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋過(guò)程要保證量和均勻性。標(biāo)準(zhǔn)品可做復(fù)孔測(cè)定，明顯偏離的標(biāo)準(zhǔn)品可舍去。每次測(cè)試，都要運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確。質(zhì)控品不在質(zhì)控單檢測(cè)范圍內(nèi)時(shí)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)無(wú)效，不能報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果，需要重新檢測(cè)。

2. 出現(xiàn)假陰性樣本可能是孵育溫度和時(shí)間不足，酶標(biāo)記物加樣量不足，顯色時(shí)間短等原因，讀數(shù)時(shí)終止時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作要求進(jìn)行；

出現(xiàn)假陽(yáng)性樣本可能是洗滌不充分，酶過(guò)量，類(lèi)風(fēng)濕因子干擾，樣本溶血，脂血等，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，注意樣本要求，洗板步驟，保證充分洗板，酶標(biāo)記物加樣量要準(zhǔn)確，顯色時(shí)間充分，終止后盡快讀板等。

1. 重復(fù)性差可能是加樣本及試劑量不準(zhǔn)，孔間不*?；加樣過(guò)快，孔間發(fā)生污染?；加錯(cuò)樣本?；加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁?；不同批號(hào)試劑盒中組分混用?；溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不*等，實(shí)驗(yàn)過(guò)程要注意上述操作。

2. 整板不顯色可能是忘記加酶或者試劑失效，酶污染，錯(cuò)加試劑等；整板顯色可能是洗滌液被酶污染，顯色液變質(zhì)，包被板不干凈等；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)注意避免試劑的污染或交叉污染，加樣前認(rèn)真辨別試劑，避免錯(cuò)誤加樣。

通用名稱(chēng)：脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱(chēng)：Poliovirus IgG ELISA
公司品牌：德國(guó)IBL
產(chǎn)品貨號(hào)：RE56921
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測(cè)樣本：血清和血漿
儲(chǔ)存條件：2—8℃
檢測(cè)方法：ELISA
預(yù)期用途：僅用于科研，體外檢測(cè)使用
參考價(jià)格：詢(xún)價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司

脊髓灰質(zhì)炎病毒ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品規(guī)格
96T

脊髓灰質(zhì)炎病毒ELISA檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途
   脊髓灰質(zhì)炎病毒Igg抗體檢測(cè)試劑盒RE56921可用于血清和血漿中抗脊髓灰質(zhì)炎特異性IgG抗體的定性和定量檢測(cè)。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介
   脊髓灰質(zhì)炎是一種由腸道病毒引起的傳染病，它廣泛流行于世界各地，并常常導(dǎo)致病人癱瘓和死亡。人類(lèi)目前知道的人致病性脊髓灰質(zhì)炎有三種類(lèi)型：
1類(lèi)（Brunhilde）：通常會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的癥狀。
2類(lèi)（Lansing）：出現(xiàn)稍微溫和的癥狀。
3類(lèi)（Leon）：少，但伴隨嚴(yán)重癥狀。
   脊髓灰質(zhì)炎病毒主要增生擴(kuò)展在腸道的淋巴節(jié)內(nèi)，并通過(guò)糞便排泄出去。咽喉也可能會(huì)感染脊髓灰質(zhì)炎病毒，之后病毒就會(huì)遺留在人體口腔內(nèi)。人感染脊髓灰質(zhì)炎后，病毒就可以通過(guò)單核細(xì)胞分布到其它淋巴節(jié)，之后在淋巴節(jié)繁殖成各種脊髓灰質(zhì)炎病毒。在第二個(gè)病毒血癥階段，病毒就停留在所有的器官和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它器官中。在90%以上感染了脊髓灰質(zhì)炎的病人都不會(huì)出現(xiàn)任何主觀癥狀，而其它剩余的病例中會(huì)出現(xiàn)：伴隨低燒的非特異性疾病、頭痛和喉嚨發(fā)炎、痢疾、嘔吐。
   脊髓灰質(zhì)炎目前還沒(méi)有治療方法，僅有阿司匹林和適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動(dòng)對(duì)癥治療會(huì)有些效果。通過(guò)檢測(cè)糞便或咽喉沖洗物中的傳染原或檢測(cè)血液中的抗體可診斷脊髓灰質(zhì)炎。血液抗體的檢測(cè)通常是通過(guò)中和檢測(cè)進(jìn)行的，雙份血清檢測(cè)有滴度差異，所以三種類(lèi)型脊髓灰質(zhì)炎病毒必須分別檢測(cè)。最近，脊髓灰質(zhì)炎IgG ELISA實(shí)驗(yàn)用類(lèi)似白喉和百日咳的方法進(jìn)行了改進(jìn)，這種新的ELISA試劑盒可同時(shí)檢測(cè)三種類(lèi)型的脊髓灰質(zhì)炎病毒。這種血清學(xué)反應(yīng)是由既往感染或免疫接種所導(dǎo)致的。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
   脊髓灰質(zhì)炎病毒Igg抗體檢測(cè)試劑盒RE56921是一種利用夾心法的固相酶聯(lián)免疫試劑盒。微孔用抗原包被，樣品中的特異性抗體結(jié)合到微孔中抗原上，之后加入對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗。之后再加入底物液，微孔中溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒組成成分

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件
   脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒必須儲(chǔ)存于2~8℃的環(huán)境中，避免高溫或太陽(yáng)直射。樣品和試劑的儲(chǔ)存和穩(wěn)定性將在相關(guān)章節(jié)闡述。開(kāi)封微孔板在有效期內(nèi)穩(wěn)定，但在2~8℃環(huán)境下儲(chǔ)存時(shí)請(qǐng)把包裝袋密封好。

脊髓灰質(zhì)炎病毒 IgG檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟

1. 加100ul標(biāo)準(zhǔn)品(A-D)和已稀釋的樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中.定性檢測(cè)中標(biāo)準(zhǔn)品僅用標(biāo)準(zhǔn)品B.

2. 封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。

3. 棄去孔中反應(yīng)液，每孔用300ul洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。

4. 加100ul酶聯(lián)物于每個(gè)反應(yīng)孔中。

5. 封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。

6. 棄去孔中反應(yīng)液，每孔用300ul洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。

7. 每孔加TMB底物液100ul

8. 室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘

9. 依加底物的順序每孔加100ul終止液

10. 1小時(shí)內(nèi)在450nm處讀吸光度

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