特異性的挑選首要需求考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、試驗方法特異性、符號物的特異性。

 

    1、蛋白特異性：

 

    針對需求檢測的蛋白查找抗體，幾個細節要區分，重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不一樣的，注意檢查抗體說明書的檢測說明。假如重組蛋白不是全長表達，則需求注意抗體的免疫原區域是否在重組蛋白區域內。內源性蛋白能清楚其剪切與潤飾的方式，特殊表型的蛋白需求進行序列比對，并結合抗體免疫原序列，檢查穿插反應的狀況。磷酸化蛋白檢測需求確認具體位點，不同位點的磷酸化意味著或許有不同的機制存在，不宜混為一談。

 

    2、種屬特異性：

 

    同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。目前大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規劃多肽抗原的，根據蛋白的同源性狀況與其他種屬發生穿插反應。需求參照說明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體，可以經過蛋白的序列比對，挑選同源序列免疫的抗體，不過一般這種狀況生產商不會受理其關于質量的申述，假如可以申請到免費的抗體樣品，則利于抗體挑選。。

 

    3、符號物的特異性

 

    一般基于試驗操作的試驗方法不會運用帶有符號的一抗，比方WB、IHC等，都是經過二抗類的試劑符號達到成果出現的意圖。可是基于儀器剖析的一些試驗，或許就會運用到直接符號的一抗，比方流式試驗。那么需求了解到自己將要運用的儀器能檢測到的熒光規模，針對不通的參數要求挑選對應的符號物。在免疫熒光雙標試驗中，需求選配不同的熒光符號物。

 

    二、抗體種屬來歷的挑選：

 

    有人以為單抗比多抗好，其實這并不是一個嚴謹的觀點，只能說在或許性上單抗的特異性更好一些，而多抗的親和力會優于單抗，而且特異性并不一定就遜于單抗，首要看抗原的規劃水平。目前商品化抗體里單抗首要是鼠單抗、兔單抗，多抗首要是兔多抗、山羊多抗等，其他種屬來歷抗體較少。不主張糾結于單抗好還是多抗好，能做出試驗的抗體便是好抗體。

 

    在挑選上一般主張試驗種屬和抗體種屬親緣性越遠越好，不宜同源。抗體不同種屬會要影響接下來二抗的選配。特別是在免疫熒光雙標試驗中，需求在差異于試驗種屬的基礎上，區分開兩個目標的抗體種屬來歷，以便于二抗差異識別。

 

    三、關于品牌的挑選：

 

    由于抗體品質的異質化，關于抗體的品牌挑選就被我們所注重，可是不管是什么品牌都難免會遇到不合適自己試驗的抗體。所以一般主張考慮那些業界普遍認可、購買方便、專業、售后處理快捷的品牌。一些乃至都沒有正式代理的，只能備選。一起購買時一定要找可以供給產品指導、試驗剖析、售后處理的正規代理商購買，防止由于買到假貨水貨影響試驗。

 

    別的不要糾結于WB過程中分子量的問題。許多時候，我們看到相同的抗體，不同的品牌，乃至同一品牌不同的貨號，標注的分子量都不一樣。其實或許只是生產商只檢測時運用了不同的種屬不同的樣品類型，或是參照了不同的文獻，對運用者來說，相同的樣品，不管運用哪個品牌的，只需抗體是對的，意圖條帶只會出現在相同的位置。